案例背景
某國立大學生物醫學研究所開發了一系列針對新型腫瘤標記的單株抗體,需要建立這些抗體在福馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織上的 IHC 染色條件。由於這些是全新的研究用抗體,沒有現成的染色方案可參考,因此委託拓生科技進行系統性的條件優化。
服務需求
- 抗體數量:5 支新型單株抗體
- 優化項目:抗原修復方法(pH 6.0 vs pH 9.0)、修復時間、抗體稀釋度(1:50 至 1:2000)、孵育時間與溫度
- 對照組織:使用已知陽性的人體組織作為陽性對照
- 目標:建立每支抗體的最佳 IHC 染色方案(SOP)
優化策略
- 第一階段:抗原修復篩選
每支抗體分別測試 4 種抗原修復條件:pH 6.0 Citrate Buffer(15min/30min)及 pH 9.0 EDTA Buffer(15min/30min),以中等稀釋度(1:200)進行初步篩選。
- 第二階段:稀釋度優化
選定最佳修復條件後,測試 6 個稀釋度梯度(1:50, 1:100, 1:200, 1:500, 1:1000, 1:2000),評估訊號強度與背景比值。
- 第三階段:孵育條件微調
比較 4°C 過夜 vs 37°C 1小時 vs 室溫 2小時的孵育條件。
- 第四階段:驗證與 SOP 建立
以最佳條件在 10 例不同組織上進行驗證,確認重現性後撰寫標準作業程序。
結果
5 支抗體全部成功建立了可靠的 IHC 染色方案。優化過程共使用約 300 片切片,歷時 4 週完成。最終的 SOP 文件包含詳細的染色步驟、品管標準及故障排除指引,研究團隊可據此在自己的實驗室重現染色結果。
拓生科技的優勢
拓生科技樂於與學術研究單位合作,提供 IHC 技術開發與條件優化服務。我們的技術團隊具有豐富的抗體優化經驗,能夠有效率地建立可靠的染色方案。歡迎研究委託或聯絡我們討論合作機會。

