什麼是細胞塊（Cell Block）？它為何對 IHC 診斷至關重要？

細胞塊（Cell Block）是將液態或半液態的細胞學檢體，如胸水、腹水、腦脊髓液、痰液、尿液及細針穿刺抽吸物（FNA）等，經過一系列處理後形成的固態細胞團塊，它對免疫組織化學（IHC）診斷至關重要，因為它能將分散的細胞轉化為類似組織切片的型態，極大擴展了 IHC 在非組織檢體上的應用。

這項技術使得複雜的 IHC 免疫組織化學染色原理 分析得以在細胞學檢體上實施，為微創診斷提供了強大的支持。細胞塊的製作過程涉及細胞的離心、固定與包埋，最終形成可進行切片、染色和病理學觀察的石蠟包埋塊。

傳統細胞學塗片在 IHC 應用上存在顯著限制。塗片上的細胞數量有限，且容易在染色過程中脫落，難以進行多重 IHC 染色或後續的分子檢測。相比之下，細胞塊能提供豐富的細胞量，並有效維持細胞的三維結構與抗原完整性，極大地提升了 IHC 染色的成功率與判讀準確性。

根據美國病理學會（CAP）的統計，約有 20-30% 的癌症診斷仰賴於細胞學檢體，其中細胞塊技術的應用比例逐年上升，特別是在肺癌和胰腺癌的診斷中。

細胞塊的製作原理與常見方法有哪些？

細胞塊的製作原理是將分散的細胞聚集、固定並最終包埋於石蠟中，使其成為可切片的固體，常見方法包括瓊脂法、血漿凝塊法和濾膜法等，這些方法的核心目標都是為了維持細胞形態與抗原的完整性。

標準化的操作流程對於確保細胞形態與抗原的完整性至關重要，這直接影響後續 IHC 染色的結果。抗原修復（Antigen Retrieval, AR）在細胞塊 IHC 中尤為關鍵，因為細胞在固定和包埋過程中其抗原表位可能被遮蔽，需要透過熱修復或酶消化來恢復，詳情可參考 IHC 抗原修復技術：熱修復與酶修復。

2.1 細胞塊製作的關鍵步驟

• 檢體收集與前處理： 檢體應盡快送檢，防止細胞變性。對於液態檢體，需進行離心以濃縮細胞。
• 固定： 選擇合適的固定液至關重要，10% 中性福馬林（Neutral Buffered Formalin, NBF）是最常用的固定劑，固定時間通常為 6-24 小時。過度固定可能導致抗原表位破壞，影響後續 IHC 染色。
• 細胞團塊形成： 這是細胞塊製作的核心。常見方法包括：
  • 瓊脂法（Agar Method）： 將細胞沉澱物與融化的瓊脂混合，冷卻凝固後再進行脫水、透明和石蠟包埋。此法操作簡便，細胞形態保持良好。
  • 血漿凝塊法（Plasma-Thrombin Clot Method）： 利用患者自身的血漿和凝血酶形成凝塊，將細胞包裹其中。此法能有效捕捉少量細胞，但可能引入非特異性染色背景。
  • 濾膜法（Filter Method）： 細胞通過濾膜被截留，隨後將濾膜與細胞一同包埋。適用於細胞量較少的檢體。
• 脫水、透明與石蠟包埋： 遵循標準組織處理流程，將細胞團塊逐步脫水、透明，最終浸潤於石蠟中形成石蠟塊。
• 切片與染色： 將石蠟塊切成 3-5 微米的薄片，進行常規 H&E 染色和 IHC 染色。

標準化操作流程能顯著降低批次間差異。一項發表於《Journal of Clinical Pathology》的研究指出，嚴格遵循標準操作程序的實驗室，其細胞塊 IHC 陽性率與組織 IHC 陽性率的符合度可達 95% 以上。

細胞塊 IHC 染色的應用範疇與診斷優勢是什麼？

細胞塊 IHC 染色的應用範疇極為廣泛，涵蓋了腫瘤的診斷、分型、預後評估及治療指導等，其主要診斷優勢在於能夠利用微創檢體提供與組織學檢體相似的診斷資訊，彌補了傳統細胞學塗片的不足。

細胞塊 IHC 在多種臨床情境下發揮關鍵作用，特別是當手術活檢難以實施或風險較高時。例如，對於肺部結節、胰腺腫塊或淋巴結轉移的診斷，細針穿刺（FNA）結合細胞塊 IHC 能夠提供快速且可靠的診斷依據。

3.1 主要應用領域

• 腫瘤診斷與分型： 透過一系列腫瘤標誌物（如 CK7, CK20, TTF-1, Napsin A, CDX2, GATA3 等）的染色，可幫助判斷腫瘤的來源、類型，區分原發癌與轉移癌。例如，在區分肺腺癌與鱗狀細胞癌時，TTF-1 和 Napsin A 的陽性表達對肺腺癌具有高度特異性。
• 預後評估： 某些標誌物（如 Ki-67 增殖指數、p53 突變蛋白）的表達水平與腫瘤的侵襲性及患者預後密切相關。
• 治療指導： 在靶向治療時代，PD-L1、HER2 等生物標誌物的檢測對於選擇合適的治療方案至關重要。細胞塊 IHC 能夠為這些關鍵標誌物的檢測提供足夠的細胞量和良好的抗原保存。
• 感染性疾病診斷： 特定病原體抗原的檢測，如 CMV、EBV 等，可用於輔助診斷感染性疾病。

細胞塊 IHC 的優勢在於其多功能性。一個細胞塊可進行多達 10-20 種不同的 IHC 染色，甚至可進行後續的分子病理檢測（如 FISH、PCR 等），這在傳統細胞學塗片上幾乎無法實現。

「細胞塊技術已成為現代細胞病理學不可或缺的工具，它將細胞學診斷從形態學觀察提升到分子水平，極大地拓寬了微創診斷的範疇和精準度。」

— WHO 腫瘤分類，第 5 版

如何確保細胞塊 IHC 染色的品質控制與判讀準確性？

確保細胞塊 IHC 染色的品質控制與判讀準確性，需要從檢體前處理、標準化製作流程、染色操作、內部品質控制以及病理醫師的專業判讀等多個環節進行嚴格把關。