案例背景
某國立大學神經科學研究所正在進行阿茲海默症動物模型研究，需要對小鼠腦組織進行多重免疫螢光（IF）染色，以同時觀察神經元、星狀膠質細胞及微膠質細胞在不同腦區的分布與活化狀態。研究共包含 APP/PS1 轉基因小鼠與野生型對照各 8 隻，需分析海馬迴與大腦皮質區域。
服務需求
- 冷凍切片：小鼠腦組織冷凍切片，厚度 30μm（自由漂浮切片法）
- 三重免疫螢光染色：
- NeuN（Alexa Fluor 488，綠色）：標記成熟神經元
- GFAP（Alexa Fluor 568，紅色）：標記星狀膠質細胞
- Iba1（Alexa Fluor 647，遠紅色）：標記微膠質細胞
- DAPI 核染色：藍色螢光標記所有細胞核
- 共焦顯微鏡成像：Z-stack 掃描，每個區域取 10 個光學切面
技術挑戰與解決方案
多重螢光染色的最大挑戰在於避免螢光通道之間的光譜串擾（spectral bleed-through）。拓生科技採用以下策略：
- 螢光團選擇：選用光譜分離度高的 Alexa Fluor 系列螢光團（488/568/647），最大程度減少串擾
- 抗體配對優化：根據各抗體的宿主物種進行合理配對，避免交叉反應
- 封閉條件優化：使用含 5% 正常驢血清的封閉液，有效降低非特異性背景
- 共焦參數設定：針對每個螢光通道獨立設定雷射功率與偵測器增益
結果摘要
多重螢光染色成功揭示了 APP/PS1 小鼠腦組織中的神經炎症特徵：海馬迴 CA1 區域的 GFAP 陽性星狀膠質細胞密度較野生型增加 2.3 倍；Iba1 陽性微膠質細胞呈現活化型態（胞體增大、突起縮短）；NeuN 陽性神經元數量在 Aβ 斑塊周圍顯著減少。
拓生科技的優勢
拓生科技在多重免疫螢光染色與共焦顯微鏡成像方面具有豐富經驗，能夠為神經科學研究提供高品質的技術支援。歡迎聯絡我們討論您的研究需求。